《超級瑪麗64DS》是有多個游戲模式的游戲，模式分別有VS對戰模式、Adventure冒險模式和Rec Room迷你小游戲模式，這個游戲的操作方式也有三種，分別是標準模式、點觸模式、雙手模式。
“到城堡來，我特意為你烤了一個大蛋糕。”應桃花公主之邀，馬力歐與路易吉，瓦力歐來到了蘑菇城堡。但是因為等了很久也不見他們三個出來，耀西決定進城堡一探究竟。進了城堡里面，耀西才發現里面空無一人。
酷霸王偷走了守護城堡的力量之星并把桃花公主關進了墻上的畫中。也許，馬力歐和他的朋友們也被關進了畫中！為了拯救桃花公主和馬力歐他們，耀西也躍入了墻上的畫中！游戲的操作方法有三種：標準模式、點觸模式、雙手模式。
VS對戰模式：可以支持最大四人單卡無線聯機的模式，可以在此與朋友們共享對戰冒險之樂。
Adventure冒險模式：游戲最主要的模式，以威力星來定義各關卡及任務，并以取得各關卡的威力星作為目標，在原N64版本的基礎上增至150顆，全部15個場景世界的120顆基本關卡威力星和30顆隱藏關卡威力星，另游戲內容更加地豐富。
Rec Room迷你小游戲模式：通過在冒險模式游戲過程中各角色抓到兔子來相繼開啟的Mini游戲，初期設定為8款，全部共36款游戲，作為在NDS版中獨增的模式，其耐玩度和游戲趣味不壓于冒險模式的主游戲。
Y鍵：加速跑，在山坡等地形需要不斷地加速沖才可通過。
B鍵：最直白的跳躍，依照各角色的能力效果各不相同，加速配合跳將能達到更好的效果。
A鍵：最直接的攻擊，對于耀西來說則是用舌頭吞吐。
R鍵：下蹲，雖然單獨用的機會不多，但配合跳躍使用的話能衍生其他技能。
下壓，B+R鍵：跳起后在空中按R，最常用的破壞技，用于破壞正下方的物體，效果依照各角色的力量來決定，耀西不具備，瓦里奧的最強。
后空翻，R+B鍵：先按住R呈下蹲狀再跳躍，高度強于普通跳躍。
三段跳，B、B、方向+B鍵：在第一次跳躍快落地時按跳能使出二段跳，若在此快落地時再配合方向鍵按B則可使出三倍高度的三段跳。
折返跳：正方向+Y再接著反方向+B。
長跳：方向鍵+R+B。
踢腿：A+A+A（耀西不能）。
跳踢:B+A（耀西不能）。
拿舉物體：A（耀西不能）。
拋擲物體：A（耀西不能）。
爬行前進：R+方向鍵。
貼墻前進：同時按住面朝著墻的方向和前進方向。
滑行攻擊：在加速跑過程中按A（耀西不能）。
滑踢：在加速跑過程中按方向鍵+R+A。
掃膛腿：按住R的時候再按A。
攀爬：面向桿子按A。
倒立：在桿子頂端按上鍵。
有很多的朋友進入本網站后發現不會下載，今天小編給各位玩家詳細講解一下下載的方法，在看完這個篇文章后，各位玩家一定會學會如何才能下載的，不過各位朋友一定都要看完才行啊！如果還是不會去評論區留言吧！（點擊鏈接看完里面的內容）
1、游戲安裝運行的時候出現缺少dll、內存不能讀、配置不正確等，請下載對應的單機游戲常用插件運行庫。
2、游戲可能被某些殺毒軟件提示，部分報毒與破解漢化有關，請謹慎下載。
